武建海副主任医师
江苏省中医院 营养科
1.准备工作:在开始接种前,需将琼脂平板置于室温下平衡至适宜温度,并准备好火焰,例如酒精灯,用以灭菌接种环。
2.接种环灭菌:
将接种环在火焰上灼烧直至环全部呈红热状态,这一过程通常需要几秒钟。
灼烧后,待接种环自然冷却数秒以防止高温杀死细菌,不得用手或其他物体触碰接种环头部。
3.取样步骤:
用灭菌后的接种环轻轻挑取少量的大肠杆菌或葡萄球菌菌落。
在获取菌落时,尽量减少接种环与周围环境的接触,确保样品的纯净。
4.接种到琼脂平板:
将接种环以划线法(如三点划线、四象限划线)在琼脂表面轻轻涂抹,以便形成单个菌落。
滑动接种环时,力道要轻,以免破坏琼脂表面。
5.孵育条件:
接种完成后,将琼脂平板盖好并倒置放入恒温箱中,通常37°C是大肠杆菌和葡萄球菌的最佳生长温度。
孵育时间一般为18-24小时,此间段内应避免干扰平板,以利于菌落稳定增长。
接种过程中,保持无菌操作是关键。每次接种前,接种环均需重新灭菌,且在处理不同菌种之间,应更换或清洁接种工具以防交叉污染。