张晓文副主任医师
东南大学附属中大医院 泌尿外科
1.样本采集:从受试者处收集尿液样本。尿液中可能含有病原体的DNA或RNA,尤其在感染性疾病检测中显得尤为重要。
2.DNA提取:利用化学试剂或机械方法,从尿液样本中提取总DNA。提取的DNA包括目标病原体和宿主的基因组DNA。
3.PCR反应:合成特异性引物,这些引物能够识别并结合目标DNA序列。使用热循环仪进行多个循环的DNA变性(高温使双链DNA分离)、退火(引物结合到单链DNA上)和延伸(聚合酶延长DNA链)。
4.扩增结果检测:通过凝胶电泳或荧光标记的方法检测扩增后的DNA片段。若存在目标片段,则表示样本中存在相应的病原体或目标基因。
该技术具有高度的敏感性和特异性,能在样本中微量存在时检测出目标DNA。由于其快速、准确的特点,PCR广泛应用于临床诊断、基因检测和科研领域。在实际操作中需注意避免污染,以保证结果的可靠性。