陈晓东副主任医师
江苏省中医院 整形外科
1.初步清洗:将外植体置于流水下冲洗约10-20分钟,以去除表面附着的泥土和杂质。
2.表面消毒:
将外植体浸泡在70%酒精溶液中30秒至1分钟,进行初步杀菌。
随后,将外植体转移至含有0.1%至1%氯化钠或次氯酸钠溶液(漂白剂)中,浸泡5到20分钟。时间长短取决于外植体的种类和具体需求。
3.中和处理:如果使用了次氯酸钠溶液,需将外植体放入无菌水中反复漂洗3至5次,每次1分钟左右,以去除残留的消毒剂。
4.灭菌处理:根据需要,可进一步使用紫外线灭菌灯照射消毒,通常持续15至30分钟。
5.测试无菌性:将消毒后的外植体在无菌环境中培养数天,观察是否有微生物生长,以验证消毒效果。
这些步骤可以最大程度地确保外植体的无菌性,有利于后续的组织培养实验的成功。