宋波洋副主任医师
江苏省中医院 乳腺外科
1.样本准备:从患者的乳腺癌组织中获取样本,通常是通过活检或手术切除获得的固定石蜡包埋组织切片。
2.脱蜡和水化:将石蜡切片中的石蜡去除,并通过一系列降浓度的酒精溶液恢复切片的水状态,以便进行染色。
3.消化和处理:使用蛋白酶等消化剂处理切片,以打破细胞膜并增强探针进入细胞核的能力。
4.荧光探针混合物的应用:将标记有荧光染料的DNA探针与处理过的组织切片结合,这些探针专门设计用于与样品中的特定基因序列互补结合。
5.杂交:在严格控制的温度下让探针与样本DNA结合,此过程中探针会与目标基因序列形成杂交。
6.洗涤:以特定缓冲溶液洗去未结合或非特异性结合的探针,从而确保结果的准确性。
7.检测:使用荧光显微镜观察样本,对比正常细胞来确定是否存在基因扩增或重排。通常,检测人员会计数每个细胞中染色信号的数量,以确定HER2基因的扩增状态。
8.结果分析:根据检测到的荧光信号数量判断是否存在基因扩增。通常,如果每个细胞核中信号的平均数量超过了一个特定阈值,则认为HER2基因是扩增的。
FISH检测在乳腺癌的诊断和治疗管理中起着至关重要的作用,因为HER2阳性的乳腺癌可能对某些靶向治疗药物有效。了解FISH检测的步骤和意义可以帮助更好地解读检测结果并制定更为精确的治疗方案。