文旭主任医师
江苏省肿瘤医院 普外科
1.样本采集:需收集可能含有狂犬病毒的样本,如唾液、脑脊液或组织样本。样本处理时应佩戴手套和护目镜,以防止意外接触和感染。
2.试剂准备:确保试剂盒在使用前达到室温,并检查试剂的有效期和完整性。试剂盒内通常包含检测缓冲液、洗涤液、酶结合物和显色剂等。
3.样本处理:根据说明书指示,将一定体积的样本加入到反应孔中,加入适量的检测缓冲液,并充分混匀。部分试剂盒可能要求对样本进行预处理,如加热或离心。
4.孵育步骤:将样本与特定抗体或其他检测成分结合后,需要在特定温度下孵育一段时间,一般为30分钟至2小时。这一过程允许病毒抗原与试剂中的抗体发生反应。
5.洗涤和检测:孵育结束后,移除样本溶液并用洗涤液多次清洗,以去除未结合的物质。然后加入酶结合物,再次孵育并洗涤,使得结合的抗原通过酶促反应产生可检测的信号。
6.显色反应:加入显色试剂,与酶作用产生颜色反应。根据时间控制显色强度,然后加入终止液以稳定反应结果。
7.结果判读:通过比对颜色变化或使用读数仪器进行定量分析。试剂盒说明书会提供结果判读的具体标准,如颜色深浅对应阳性或阴性。
操作过程中要避免污染,使用后的材料应按照生物危害废物处理。同时,若怀疑暴露于狂犬病毒,应及时就医并报告相关医疗机构。