蛋白质含量测定的方法有哪些

2024-12-28
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武建海副主任医师

江苏省中医院 营养科

病情分析:蛋白质含量测定的方法主要包括凯氏定氮法、双缩脲法和紫外分光光度法。这些方法在准确性、操作复杂性和应用范围上各有不同。

1.凯氏定氮法:

通过测定样品中的氮含量间接推算出蛋白质含量。

样品在硫酸中消化,将有机氮转化为铵离子。

铵离子与碱反应生成氨气,再被吸收后进行滴定。

优点是精确度高,适用于大多数食品和饲料,但操作较复杂,耗时长且需要使用浓酸和碱。

2.双缩脲法:

基于蛋白质中肽键与铜离子在碱性条件下形成紫色络合物。

通过比色法测定络合物的吸光度,从而计算蛋白质含量。

操作简单快速,适用于多种生物样品,但需要确保样品中无干扰物质如强还原剂。

3.紫外分光光度法:

利用蛋白质在280nm波长处的紫外吸收特性进行测定。

蛋白质中的芳香族氨基酸(如酪氨酸和色氨酸)在该波长处有显著吸收峰。

方法快速、方便,但需校正背景干扰,并且对低浓度样品的检测灵敏度较差。

以上几种方法各有优劣,实际选择时应根据实验目的、样品性质以及所需测定的准确性进行综合考虑。

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