邓荣副主任医师
江苏省肿瘤医院 乳腺外科
1.样本准备:从患者的乳腺组织中获取样本,通常使用活检或手术切除的方法。获得的组织块会经过固定、脱水和包埋等处理步骤,以便在显微镜下进行分析。
2.组织切片制作:将处理好的组织块切成薄片(通常为3-5微米厚),并将这些切片粘附在载玻片上以便进一步分析。
3.探针杂交:使用专门设计的荧光标记DNA探针,这些探针能够特异性地结合到HER2基因序列上。在这一过程中,试剂通过杂交使探针与组织切片中的目标DNA互补配对。
4.荧光显色和检测:杂交完成后,过多的探针会被清洗掉,然后在显微镜下观察切片。探针结合处会发出荧光信号,可用来指示HER2基因的存在和数量状态。
5.结果分析:实验人员通过计算每个细胞核内的HER2信号数目以及对比参考基因信号数目,来判断是否存在基因扩增。一般而言,每细胞有超过六个HER2信号或HER2/CEP17信号比值大于2.0均被视为基因扩增阳性。
6.报告生成:最终,根据检测数据生成报告,提供关于HER2基因状态的信息。这些信息对于指导乳腺癌治疗方案选择至关重要。
HER2基因扩增状态的准确判断对于制定个体化治疗策略非常重要,特别是在选择抗HER2靶向药物时。确保样本质量和规范操作是提高检测准确性的关键因素。