狂犬病疫苗是如何生产的

狂犬病疫苗的生产以细胞培养为核心，将狂犬病病毒固定株接种于传代细胞或人二倍体细胞，经增殖、收获、浓缩、灭活与纯化后制成。现代工艺已由动物神经组织来源转向细胞培养来源，后者不良反应更少，免疫效果更稳定。

主要生产环节

1、毒种选择与传代：：生产用毒种为狂犬病病毒固定株，经多代驯化后丧失外周侵袭力，保留良好抗原性，常见株包括CTN-1株、aG株、PM株等。毒种需经严格鉴定，确认无外源因子污染后方可用于生产。

2、细胞基质培养：：将毒种接种于Vero细胞、地鼠肾细胞或人二倍体细胞。Vero细胞可微载体或生物反应器大规模培养，人二倍体细胞则多采用转瓶或细胞工厂。细胞需在适宜温度与培养基条件下生长至致密单层。

3、病毒增殖与收获：：接种后继续培养，病毒在细胞内复制，达到高峰时收获培养液。收获液经澄清、超滤浓缩，去除细胞碎片与部分杂蛋白，提高抗原浓度。

4、灭活与纯化：：加入β-丙内酯或甲醛灭活病毒，破坏其感染性而保留抗原性。随后经柱层析、密度梯度离心等步骤纯化，去除残留细胞蛋白与灭活剂。纯化后加入氢氧化铝佐剂或制成冻干剂型。

5、质量控制：：每批疫苗需检测抗原含量、效价、无菌、异常毒性及残留DNA等指标。中国食品药品检定研究院承担批签发职责，依据《中华人民共和国药典》相关要求执行。

不同基质的特点

• Vero细胞疫苗：可规模化生产，成本相对可控，全球使用广泛。
• 人二倍体细胞疫苗：来源于人类细胞，免疫原性良好，但培养成本较高，产量受限。
• 地鼠肾细胞疫苗：国内曾广泛使用，工艺成熟，现部分产品仍在使用。

世界卫生组织在2018年发布的狂犬病疫苗立场文件中指出，细胞培养疫苗在暴露后预防中具有可靠的安全性与免疫原性，推荐用于所有暴露后处置。中国疾病预防控制中心2023年发布的狂犬病预防控制技术指南同样明确，暴露后应尽早接种细胞培养狂犬病疫苗。

疫苗生产全程在药品生产质量管理规范条件下进行，从毒种到成品需经历数月。接种后机体产生中和抗体，于第14天左右达到保护水平；严重暴露者需同时使用狂犬病免疫球蛋白。

常见问题

是。生产中使用狂犬病病毒固定株，但经灭活处理后病毒失去感染性，仅保留刺激免疫系统产生抗体的能力。

是。细胞培养疫苗不含神经组织成分，发生神经系统不良反应的风险明显低于传统神经组织疫苗，现已成为主流工艺。

从细胞培养到成品放行通常需要数月。其中病毒增殖与收获约数天至两周，纯化、灭活及质量检验占大部分时间。

两者基质不同。人二倍体细胞来源于人类胚胎肺组织，Vero细胞来源于非洲绿猴肾细胞，均经严格检定，免疫效果均获认可。

参考资料

[1] 世界卫生组织. 狂犬病疫苗立场文件. 2018.

[2] 中国疾病预防控制中心. 狂犬病预防控制技术指南. 2023.

[3] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典（三部）. 中国医药科技出版社.

[4] 中国食品药品检定研究院. 生物制品批签发管理办法.