张晓文副主任医师
东南大学附属中大医院 泌尿外科
1.开始前应确保所有所需设备和材料准备就绪,包括琼脂平板、接种环、酒精灯或其他消毒装置等。通常使用血琼脂或麦康凯琼脂作为培养基。
2.使用无菌的接种环进行尿液样本的采集。点燃酒精灯,通过火焰将接种环烧灼至红热,以灭菌。
3.待接种环冷却后,将其浸入尿液样本中,确保液体能够形成薄膜附着在环上。
4.将样本接种到琼脂平板上,采用划线法:将接种环接触琼脂表面,从一侧开始划出第一条直线,然后旋转平板90度,划第二条线,与第一条线成角相交,再旋转平板,继续划第三条线,依此类推。通常通过三至四次划线,以便稀释细菌并形成单独的菌落。
5.划线完成后,将平板倒置放入培养箱,通常在35-37摄氏度下培养24-48小时。
6.培养结束后,观察平板上的菌落生长情况,根据菌落数量和形态进行初步分析。在临床环境中,通常认为每毫升尿液中存在100,000个或更多菌落形成单位提示显著感染。
尿液接种划区技术要求操作者具备一定的实验室技术技能,并且需要在无菌条件下进行操作,以避免污染导致的误判。这项实验是泌尿系统感染诊断的重要工具之一,有助于快速、准确地识别病原体并指导临床治疗。