宋波洋副主任医师
江苏省中医院 乳腺外科
1.样本准备:从患者的乳腺肿瘤组织中获取切片样本,样本通常固定在福尔马林中并包埋于石蜡内,以便保持组织的完整性和结构。
2.切片处理:将样本切成约4-5微米厚的切片,并放置在显微镜载玻片上进行脱蜡和水化处理。这是为了使组织能够进行后续的杂交步骤。
3.探针杂交:将特异性荧光标记的探针应用于处理过的组织切片上。探针主要靶向HER2基因位点以及一个对照位点,一般是细胞中心体旁的17号染色体位点。
4.杂交反应:在恒温下进行杂交反应,使探针能够与组织DNA中的目标序列结合。这个过程通常持续数小时甚至过夜,以确保充分结合。
5.检测与计数:使用荧光显微镜观察标本,在显微镜下可以看到荧光信号。计算每个细胞内HER2与对照基因之间的比率,通常情况下,一个比值大于2被认为是阳性结果,表明存在HER2基因扩增。
6.结果解释:根据获得的HER2基因与对照基因的比值,以及实际拷贝数调整治疗方案,对于HER2阳性患者,可能会更倾向于采用抗HER2的治疗策略如曲妥珠单抗。
准确的FISH检测结果对于乳腺癌的诊断和治疗至关重要,因此实施严格的实验室操作和专业的数据分析必不可少。在完成检测后,需要结合其他临床信息对患者病情进行全面评估。