管蔚副主任医师
江苏省人民医院 普通外科
核酸检查是通过采集呼吸道标本进行病毒核酸检测的标准化操作流程,核心步骤包括:标本采集、标本保存与转运、实验室检测、结果判读。以下为详细说明。
采集前需使用无菌拭子,被采集者需保持头部微仰、张口发“啊”音。操作者将拭子沿鼻腔底部缓缓伸入,深度约为鼻尖到耳垂的距离,约8至10厘米。随后旋转拭子停留约15秒,再取出。若采集咽拭子,则拭子需越过舌根,在咽后壁及扁桃体隐窝处反复擦拭至少3次。采集后立即将拭子头浸入含病毒保存液的采样管中,折断拭子杆并旋紧管盖。
采集完成的标本需在2至8摄氏度条件下保存,保存时间不超过4小时。若无法及时检测,需置于-20摄氏度以下冷冻保存。转运时需使用生物安全运输箱,确保密封、防漏,并标注“感染性物质”标识。转运时间应控制在2小时内,避免反复冻融。
检测前需对标本进行灭活处理,常用方法为56摄氏度加热30分钟。随后提取病毒核糖核酸,使用实时荧光聚合酶链式反应技术进行扩增。检测过程需设置阳性对照、阴性对照及内标对照,扩增循环数阈值为40。若样本中出现典型扩增曲线且循环数小于等于35,判定为阳性;若循环数大于35且小于40,需重复检测或结合临床症状综合判断;若无扩增曲线或循环数大于等于40,判定为阴性。
阳性结果提示样本中存在病毒核酸,需结合流行病学史、临床表现进行确诊。阴性结果可能因标本质量不佳、病毒载量低或检测时效性不足导致,建议在症状出现后3至7天内重复检测。需注意,核酸检查存在假阴性可能,其概率约为20%至30%,主要受采样部位、操作规范度及病程阶段影响。
核酸检查是病毒诊断的重要依据,但需严格遵循操作规范。检测前2小时应避免进食、吸烟或饮酒,以减少咽部刺激;检测时需配合操作者指令,避免因吞咽或咳嗽导致标本失败。检测后建议佩戴口罩,等待结果期间减少聚集。若出现发热、咳嗽等症状,无论核酸结果如何,均需及时就医并隔离观察。
