张传伟副主任医师
江苏省中医院 眼科
眼结膜囊真菌检查是诊断眼部真菌感染的关键手段,其阳性结果提示存在真菌性角膜炎或眼内炎等疾病,需立即进行抗真菌治疗。检查方法包括直接涂片、真菌培养和分子生物学检测,其中培养为金标准。以下从检查原理、操作流程、阳性临床意义及注意事项四方面详细说明。
取结膜囊分泌物或角膜刮取物,置于载玻片后使用氢氧化钾或荧光染色剂处理,显微镜下观察菌丝或孢子形态。此方法快速,15至30分钟可出结果,但敏感性较低,仅约40%至60%的阳性率,适用于初步筛查。
将标本接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基,在25至30摄氏度环境下培养1至4周。阳性标本可见菌落生长,进一步通过乳酸酚棉蓝染色鉴定菌种,如曲霉菌属、镰刀菌属或念珠菌属。培养敏感性达70%至90%,但耗时较长,需注意避免细菌污染。
使用聚合酶链式反应技术扩增真菌核糖体DNA内转录间隔区,2至4小时可获取结果。此方法敏感性超过95%,特异性达98%,尤其适用于培养阴性但高度怀疑真菌感染的患者,但需专业设备和试剂,成本较高。
采集前需停用抗真菌眼药水至少12小时,使用无菌棉拭子或角膜刮铲,避免接触眼睑边缘。采集后立即送检,室温下保存不超过2小时,4摄氏度保存不超过24小时,以维持真菌活性。
阳性结果需结合患者症状,如眼痛、畏光、视力下降及角膜溃疡边缘浸润。常见致病真菌包括曲霉菌(占30%至40%)、镰刀菌(占25%至35%)及念珠菌(占10%至15%)。糖尿病、长期使用糖皮质激素或佩戴隐形眼镜者风险更高。
标本量不足、抗真菌药物使用史或培养条件不当可导致假阴性,发生率约10%至20%。假阳性多由操作污染引起,需重复采集或结合临床表现判断。
眼结膜囊真菌检查是确诊眼部真菌感染的核心步骤,阳性结果提示需立即启动抗真菌治疗,常用药物包括两性霉素B、那他霉素或伏立康唑。检查前应避免自行使用抗真菌药物,以免影响结果准确性。治疗期间需定期复查,每3至7天重复培养以评估疗效。若出现眼内炎体征,如玻璃体浑浊或视网膜浸润,需考虑玻璃体腔注射抗真菌药物。注意保持眼部卫生,避免接触污染水源或土壤,对于风险人群,如长期使用糖皮质激素者,建议每季度进行眼部筛查。
