张晓文副主任医师
东南大学附属中大医院 泌尿外科
1.样本收集:首先需要收集患者的中段尿液样本。通常建议在连续三天内每天早晨收集尿液,以增加检出率。
2.细胞裂解:尿结核杆菌的细胞壁较为坚硬,因此需要使用特殊的细胞裂解缓冲液,并在某些情况下结合机械破碎方法(如超声波处理),以有效释放其中的DNA。
3.DNA纯化:利用商业化的DNA提取试剂盒或经典的方法(如苯酚-氯仿提取法)从裂解产物中分离纯化出DNA。此步骤通常包括多个洗涤和离心步骤,以确保去除蛋白质和其他杂质。
4.DNA检测:通过PCR等分子生物学技术对提取的DNA进行扩增和检测,以确认样本中是否存在结核杆菌的特异性基因序列。
整个过程需要在无菌条件下操作,并严格遵循标准实验流程,以防止样本污染或实验误差。