邓伟民主治医师
东南大学附属中大医院 中医男科
1.采集样本:通常采用非侵入性的方法,通过手淫或合适的医疗设备收集精液样本。样品应存放在无菌容器中,以防止污染。
2.保存和运输:采集后的精液样本应在室温下尽快送往实验室。如果不能立即分析,样本应储存在4°C,并避免超过24小时,以确保蛋白质的完整性。
3.样本处理:到达实验室后,样本会被离心以分离精子细胞与其余的液体成分。通常以500至1000xg的速度离心5到10分钟。
4.洗涤和复悬:离心后的精子沉淀物应使用适当的缓冲液洗涤一至两次,以去除多余的杂质,然后在分析缓冲液中再次复悬。
5.蛋白提取:通过超声波或化学试剂裂解细胞膜,释放出细胞内的SP10蛋白。这一步骤需要确保适当的温度和时间控制,以最大化蛋白质提取的效率。
6.检测准备:根据具体的检测方法(如ELISA、WesternBlot等),对提取物进行稀释和预处理,以符合检测规范。
采样和检测过程中应严格遵循标准操作程序,以确保数据的可靠性。关注样本的及时处理和保存条件,对于获得精确的检测结果至关重要。