为何精子检查需要稀释

精子检查需要稀释，通常是因为精液液化后精子浓度过高，超出检测板或计数池的线性范围，稀释后才能使计数准确。稀释并非所有标本都做，仅当精子浓度超过检测上限或需观察活力时，按标准操作进行。

精子浓度超出计数范围时的处理

1、计数池线性上限：世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》第六版指出，使用改良牛鲍计数板时，每升精子浓度超过一定数值，计数结果会因精子重叠而失真。国内多数实验室将稀释阈值设定在每毫升一亿至两亿条之间，超出即需稀释。

2、稀释液的选择：常用碳酸氢钠甲醛稀释液或生理盐水。前者可固定精子并溶解黏液，便于准确计数；后者仅用于即时观察，不适用于长期保存。稀释倍数按预估浓度计算，通常为五倍、十倍或二十倍。

3、稀释操作步骤：取液化完全的精液十微升，加入九十微升稀释液，混匀后充入计数池。室温静置一至两分钟，待精子沉降后于四百倍显微镜下计数五个中方格。每个中方格计数两次，取平均值。

4、结果换算：稀释后计数值乘以稀释倍数与计数池常数，得出原精液精子浓度。例如稀释十倍后每中方格计数二十条，原浓度约为每毫升两千万条。换算过程需在报告单中注明稀释倍数。

稀释对活力评估的影响

5、活力评估不宜稀释：精子活力受稀释液渗透压和酸碱度影响。稀释后精子运动速度可能改变，故活力评估通常采用未稀释精液。若原精液浓度极高，可先观察未稀释标本，再行稀释计数。

6、稀释液温度控制：稀释液需预热至三十七摄氏度。温度过低可导致精子凝集或活力下降，温度过高则破坏精子膜结构。北京大学第三医院生殖医学中心二零二一年发表的数据显示，稀释液温度偏差超过两摄氏度时，精子活力评估误差可达百分之十五。

稀释的临床意义

7、辅助诊断：稀释后计数可区分少精症与无精症。若未稀释标本未见精子，需离心后取沉淀物复查，避免漏诊。

8、质量控制：每批次检测需包含质控品。稀释操作重复性直接影响结果，室内变异系数应控制在百分之十以内。

操作注意事项

9、稀释倍数不宜过大：过度稀释可增加计数误差。建议稀释后每中方格精子数维持在十至四十条之间。

10、标本需充分混匀：精液液化后需吹打混匀，避免精子分布不均。混匀不充分可导致同一标本两次计数差异超过百分之二十。

精液稀释是保证精子计数准确的手段，仅适用于浓度超出检测上限的标本，活力评估通常不稀释。稀释操作需严格控温、控制倍数并充分混匀。若精液常规检查结果异常，建议前往正规医疗机构男科或生殖医学科复查，由专业人员结合病史判断。

常见问题

会。稀释可能改变精子运动速度和膜完整性，因此活力评估通常用未稀释精液，仅浓度计数时稀释。

否。仅当精子浓度超出计数池线性范围时才需稀释，多数正常浓度标本可直接计数。

在规范操作下准确。稀释倍数、温度、混匀程度均影响结果，室内变异系数应控制在百分之十以内。

常用碳酸氢钠甲醛稀释液，可固定精子并溶解黏液；生理盐水仅用于即时观察，不适用于长期保存。

根据预估浓度选择五倍、十倍或二十倍，使稀释后每中方格精子数维持在十至四十条之间。

参考资料

[1] 世界卫生组织. 人类精液检查与处理实验室手册（第六版）. 北京：人民卫生出版社，2021.

[2] 中华医学会男科学分会. 中国男科疾病诊断治疗指南（2022版）. 北京：人民卫生出版社，2022.

[3] 北京大学第三医院生殖医学中心. 精液分析室内质量控制数据报告. 中国男科学杂志，2021，35（4）：45-49.