三阴性乳腺癌的诊断需结合影像学、病理学及分子分型综合评估，具体包括乳腺超声或钼靶筛查、穿刺活检明确组织学类型、免疫组化检测雌激素受体、孕激素受体及人表皮生长因子受体2均为阴性、Ki-67增殖指数评估，以及基因检测排除BRCA突变。以下从四个核心步骤详细说明。1.影像学检查作为初步筛查手段。乳腺X线摄影（钼靶）可发现微小钙化灶或肿块，灵敏度约为85%，但致密型乳腺中易漏诊；超声检查能区分囊实性病变，对致密乳腺的检出率提升至90%以上，同时评估淋巴结转移情况；磁共振成像（MRI）对多灶性病变的敏感性达95%，常用于高危人群或术前评估。2.病理学确诊依赖穿刺活检。核心针穿刺活检获取组织标本后，通过镜下观察细胞形态，确认浸润性导管癌或小叶癌等亚型。三阴性乳腺癌多表现为高级别核异型、坏死明显，且淋巴管浸润比例较高，需与基底样型乳腺癌鉴别。
3.分子分型通过免疫组化确定。标准检测包括
雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）阳性细胞核染色比例低于1%，人表皮生长因子受体2（HER2）评分为0或1+，若评分为2+需进一步行荧光原位杂交确认无扩增。Ki-67增殖指数通常超过20%，提示高侵袭性。约70%的三阴性乳腺癌表达基底细胞角蛋白5/6或表皮生长因子受体。4.基因检测辅助治疗决策。BRCA1/2基因胚系突变在年轻患者中检出率达15%至20%，与家族遗传相关；同时检测程序性死亡配体1表达水平，评估免疫治疗适用性。循环肿瘤DNA分析可监测微小残留病灶，复发风险较其他亚型高30%至50%。三阴性乳腺癌诊断需在影像学异常部位通过活检获取病理证据，并完成免疫组化及基因检测，避免仅依赖单一方法。临床医生应警惕该亚型易早期转移的特性，建议对确诊患者进行多学科会诊以制定个体化方案。
