发布于:2021-12-06
陈璟副主任医师
宁夏医科大学总医院 普通内科
大肠杆菌革兰氏染色呈红色,属于革兰氏阴性菌。其细胞壁肽聚糖层较薄且外膜含脂多糖,乙醇脱色步骤中结晶紫与碘的复合物易被洗脱,随后复染剂沙黄或稀释复红使菌体着红色。
1、染色原理:革兰氏染色依据细菌细胞壁结构差异进行区分。革兰氏阳性菌肽聚糖层厚,脱色后仍保留结晶紫-碘复合物而呈紫色;革兰氏阴性菌肽聚糖层薄且外膜含脂质,脱色时复合物被洗脱,经复染后呈红色。
2、标准操作步骤:按《全国临床检验操作规程》推荐流程,取新鲜培养物涂片、干燥、固定;结晶紫初染约1分钟,水洗;碘液媒染约1分钟,水洗;95%乙醇脱色10至30秒至流出液无色,立即水洗;沙黄或稀释复红复染约30秒至1分钟,水洗、干燥后镜检。
3、判读要点:镜检见红色杆状菌体,即为革兰氏阴性杆菌。大肠杆菌为直杆状,两端钝圆,大小约0.4至0.7微米×1.0至3.0微米,多数菌株有周生鞭毛,可运动。
4、鉴别价值:该染色将细菌分为革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两大类,对临床初步判断病原体、指导经验性抗菌治疗方向具有参考意义。大肠杆菌是肠道正常菌群成员,也可引起肠道外感染,如尿路感染、腹腔感染等。
5、质量控制:染色结果受培养时间、涂片厚度、脱色时间影响。培养超过24小时的革兰氏阳性菌可能因细胞壁老化而呈假阴性;脱色过度可使阳性菌误判为阴性,脱色不足则阴性菌误判为阳性。每次染色宜设金黄色葡萄球菌与大肠杆菌作为阳性与阴性对照。
临床微生物实验室通常以大肠杆菌ATCC 25922作为革兰氏阴性杆菌染色的质控菌株。该菌株在标准操作下呈现典型红色杆状,可用于验证染色试剂与流程的可靠性。
大肠杆菌经革兰氏染色后显示为红色,这一结果源于其细胞壁结构特征,判读时需结合菌体形态与染色质控综合确认。
是阴性。大肠杆菌细胞壁肽聚糖层薄,乙醇脱色后结晶紫被洗脱,经复染呈红色,属于革兰氏阴性菌。
大肠杆菌革兰氏染色为什么呈红色?因其细胞壁外膜含脂质、肽聚糖层薄,脱色时结晶紫与碘复合物被乙醇洗脱,复染剂沙黄使菌体着红色。
大肠杆菌革兰氏染色镜检是什么形态?呈红色直杆状,两端钝圆,大小约0.4至0.7微米×1.0至3.0微米,多数有周生鞭毛,可运动。
革兰氏染色脱色时间对大肠杆菌判读有影响吗?有影响。脱色不足可使大肠杆菌保留紫色而误判为阳性,脱色过度则可能影响其他细菌判读,需按规程控制时间并设质控菌株。
本文由陈璟医生参与编审,最后更新于:2026-09-27 内容仅供健康科普,不能替代医生诊疗意见,详情需遵医嘱[1] 中华人民共和国卫生部. 全国临床检验操作规程(第3版). 南京:东南大学出版社,2006.
[2] 周庭银,倪语星. 临床微生物学检验. 上海:上海科学技术出版社,2012.
[3] 中华医学会检验医学分会. 临床微生物学检验基本技术规范. 中华检验医学杂志,2018.
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