孙大林副主任医师
东南大学附属中大医院 中西医结合男科
1.准备样本:需要将精液样本进行稀释。通常使用固定比例的生理盐水或专门的稀释液,以便于后续的观察和计数。
2.装载计数板:使用移液器将稀释后的精液样本小心地装载到Neubauer计数室的计数格内。需要确保样本均匀分布,避免气泡和过量装载。
3.显微镜观察:将计数室放置在显微镜下,选择合适的放大倍数(一般为400倍)进行观察。调整光线以获得清晰的视野。
4.选择计数区域:Neubauer计数室由多个方格组成,通常选择中央的大型方格进行计数,每个大型方格再分为16个小方格。
5.计数精子:在选定区域内,计数运动和不动的精子数量。建议重复多次观察和计数,以提高结果的准确性。
6.计算精子浓度:根据计数结果和稀释比例,使用公式计算每毫升样本中的精子浓度。公式为:\[(N\timesD\times1000)/V\],其中\(N\)是计数的精子总数,\(D\)是稀释倍数,\(V\)是计数区域体积(通常为0.1µL)。
实验过程中需保持操作的规范性,以确保数据的可靠性。实验室工作人员必须佩戴合适的个人防护装备,并在无菌条件下进行操作,确保样本的完整性和安全性。