结核分枝杆菌怎么培养

2024-11-04
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王永生副主任医师

南京鼓楼医院 呼吸科

病情分析:结核分枝杆菌的培养需要在特定的培养基和环境条件下进行。其主要步骤包括准备培养基、接种、培养以及观察结果。

1.培养基的选择

采用含有鸡蛋成分的Löwenstein-Jensen培养基,适合结核分枝杆菌生长。

Middlebrook7H9液体培养基和Middlebrook7H10、7H11固体培养基也常用于该细菌的培养。

2.培养基制备

Löwenstein-Jensen培养基:将蛋清、马铃薯粉、甘油、硫酸镁、磷酸氢二钾等成分混合,并高温灭菌以确保无菌环境。

Middlebrook培养基:按比例将各成分溶解并进行过滤灭菌。

3.样品处理和接种

从患者样本(如痰液)中提取细菌并进行前处理,如使用N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠消化和去污染。

将处理后的样本接种于准备好的培养基上,通常每个样本需接种多个培养基以提高检出率。

4.培养条件

温度控制在35-37℃的恒温箱中。

环境要求5-10%的二氧化碳浓度,有助于结核分枝杆菌的生长。

固体培养基通常需要6-8周才能观察到明显的菌落形成;液体培养基可能更快,但仍需数天至数周。

5.观察和结果分析

定期检查培养基,观察是否有菌落形成。典型的结核分枝杆菌菌落呈现粗糙、干燥、乳白色或奶油色外观。

若成功分离出结核分枝杆菌,则进一步进行药物敏感性试验和分子生物学检测,以确定具体菌株及其抗药性情况。

培养结核分枝杆菌需严格按照无菌操作规程进行,避免污染,同时保持适宜的生长环境。这样可以有效地分离和鉴定病原菌,进而指导临床治疗。

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