发布于:2021-03-30
陈璟副主任医师
宁夏医科大学总医院 普通内科
结核分枝杆菌在革兰染色中通常不着色或呈革兰染色弱阳性,但临床与实验室不将革兰染色作为其鉴别手段,抗酸染色才是确认结核分枝杆菌的标准方法。
1、革兰染色机制与结核分枝杆菌:结核分枝杆菌细胞壁含大量脂质,其中分枝菌酸占比可达细胞壁干重的60%左右,革兰染色中的结晶紫与碘复合物难以穿透并稳定滞留于细胞壁内,脱色步骤后碘复合物被洗脱,复染后呈现革兰染色弱阳性或不着色,故革兰染色对结核分枝杆菌鉴别价值有限。
2、抗酸染色为何更适用:结核分枝杆菌细胞壁的分枝菌酸与石炭酸复红结合后,可抵抗盐酸酒精脱色,被复染剂亚甲蓝复染后仍呈红色,这一特性称为抗酸性。世界卫生组织在2021年发布的结核病实验室诊断指南中明确,抗酸染色镜检仍是资源有限地区肺结核疑似病例的推荐初筛方法之一。
3、临床标本中的染色选择:痰液、支气管灌洗液等标本直接涂片时,若采用革兰染色,结核分枝杆菌常表现为不着色或染色浅淡,易被漏检;采用萋-尼氏抗酸染色,在油镜下每100个视野发现1至10条抗酸杆菌即可报告阳性,这一阈值来自中国疾病预防控制中心结核病实验室操作规范。
4、分子检测的地位:世界卫生组织2021年指南同时推荐Xpert MTB/RIF等分子检测作为疑似肺结核的初始诊断方法,其对结核分枝杆菌复合群的检出灵敏度在痰标本中约为85%至90%,且可同时检测利福平耐药相关基因突变。抗酸染色与分子检测联合使用,可提高病原学阳性检出率。
5、培养与鉴定的关系:结核分枝杆菌在罗氏培养基上生长缓慢,需4至8周方可形成肉眼可见菌落,液体培养可缩短至1至3周。菌落经抗酸染色确认抗酸性后,再结合分子生物学方法鉴定菌种。革兰染色在分枝杆菌属鉴定流程中不作为常规步骤。
抗酸染色阳性并非结核分枝杆菌独有,非结核分枝杆菌亦可呈抗酸染色阳性,故抗酸染色阳性仅提示分枝杆菌属感染可能,不能直接确诊结核病。确诊需结合分子检测、培养鉴定及临床表现综合判断。免疫功能低下者痰涂片抗酸染色可为阴性,此时不能排除结核分枝杆菌感染。
通常不着色或呈弱阳性。因其细胞壁脂质含量高,革兰染色试剂难以稳定附着,故革兰染色不用于结核分枝杆菌鉴别。
为什么结核杆菌不用革兰染色来检查?革兰染色对结核分枝杆菌着色差、易漏检。抗酸染色能利用其抗酸性特征,在油镜下更可靠地识别,故为推荐初筛方法。
抗酸染色阳性就一定是结核病吗?否。非结核分枝杆菌也可抗酸染色阳性,该结果仅提示分枝杆菌属感染可能,确诊需结合分子检测、培养及临床表现。
结核杆菌培养需要多长时间?罗氏培养基需4至8周,液体培养可缩短至1至3周。培养阳性后仍需抗酸染色及分子方法鉴定菌种。
本文由陈璟医生参与编审,最后更新于:2026-09-27 内容仅供健康科普,不能替代医生诊疗意见,详情需遵医嘱[1] 世界卫生组织. 结核病实验室诊断指南. 2021.
[2] 中国疾病预防控制中心. 结核病实验室操作规范. 北京: 中国疾病预防控制中心.
[3] 中华医学会结核病学分会. 结核病诊断与治疗指南. 中华结核和呼吸杂志.
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